为什么应用火箭免疫电泳时需考虑诸多影响因素？

答：火箭免疫电泳虽较单向免疫扩散技术更为快速、方便，但在应用时也受众多因素影响。首先，火箭免疫电泳只适用于pH 8.6以上环境中带有负电荷的蛋白质抗原。IgG、IgA等在pH 8.6条件以下净电荷几乎为零，若要使其在电场中也向正极移动，可用经甲醛与蛋白质分子中的氨基结合即甲酰化处理来增加其净负电荷量，抑制碱性基团的解离，使本来带两性电荷的蛋白质分子变为只带负电荷，加快电泳速度，抵消电渗作用，而出现伸向阳极的火箭峰。

另外，火箭免疫电泳所用的琼脂需选择无电渗或电渗小的，不然易使火箭形成的形状不规则，其次是注意电泳的终点时间，如果火箭电泳的顶部呈现不清晰的云雾状或圆形，皆提示未达终点，应继续电泳。当标本数量多时，电泳板应先置电泳槽上，搭桥并开启电源（电流要小）后再加样，加样后马上电泳，否则易形成宽底峰形，使定量不准。在作IgG定量和测定补体蛋白时，血清分离后应立即使用，若不马上测定应置于-20℃冻存。此外，抗原和抗体的比例要适宜，抗原过浓不能得到圆锥状尖峰，而抗体太浓会使沉淀峰太低，从而影响实验的灵敏度。