答:在补体结合反应检测病毒时,当病毒抗原低于一定浓度时反应消耗的补体也很少,此时用已知抗体检测组织细胞中增殖的未知病毒抗原很可能会出现假阴性结果。此外,抗原的纯度、活性对试验结果也有明显影响。病毒在细胞内增殖,病毒抗原不易全部释出,且在获取的抗原成分中容易混有细胞成分,其中的类脂具有非特异性的抗补体作用,容易导致假阴性结果的发生。为此,试验中要采用多次病毒传代,细胞病变良好的材料作抗原,必要时可将抗原浓缩处理或用大剂量病毒感染细胞,以提高抗原滴度,并采用反复冻融等方法处理培养细胞,来提高病毒的释放率。如果血清中含有非特异性灭活病毒的物质和抗补体物质,一般可以加热处理灭活。通常认为4℃结合过夜的敏感性比37℃1小时结合法高,而且不影响特异性。反应中的pH以7.0~8.4最佳,灵敏度可增加四倍。

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