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酶免疫检验

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    • 为什么竞争法常用于测定抗体含量较高的标本?

      答:竞争法是将待检样品和酶标记抗体或酶标记抗原同时加入反应孔中温育,使之与包被抗原或包被抗体竞争性地结合,因此,本法既可以包被抗体检测抗原,也可以包被抗原检测抗体。用竞争

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    • 为什么ELISA检测标本时要设定合适的对照?

      答:ELISA检测需要设置阳性对照孔和阴性对照孔以保证实验的准确性,如:用夹心法和间接法ELISA测定时,阳性对照孔应该显色,阴性对照孔应该无色;竞争和竞争抑制法ELISA中阳性对照孔应

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    • 为什么ELISA检测前必须对包被的微量反应板进行质量鉴定?

      答:可溶性抗原或抗体吸附于固相载体而成为不溶形式,这是进行酶标记测定的基本条件。许多物质可作为固相载体,如纤维素、交联右旋糖酐、琼脂糖珠、聚丙烯、聚苯乙烯、聚乙烯及聚

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    • 为什么ELISA操作中必须洗涤充分?

      答:洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤,但一定程度上影响检测结果的准确性。通过充分洗涤才能达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。洗涤的方法除某些ELISA仪器配有特殊的

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    • 为什么ELISA操作均需有封闭的步骤?

      答:固相载体在抗原或抗体包被后,吸附的蛋白仅占固相载体表面的一小部分,而留有许多空余位置,这些空余位置是造成酶标记物非特异性黏附,导致检测背景增高的主要原因。因此,在包被后

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    • 为什么ELISA测定时需特别注意检测的重复性?

      答:ELISA作为临床常用的免疫检测方法之一,可批量化操作,通常情况下不需特殊大型自动化仪器;因此检测成本较低。正因为其手工操作程序多,与全自动的发光测定系统,测定重复性稍逊,较

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    • 为什么ELISA测定易受到时间、温度和pH的影响?

      答:由于反应条件会影响ELISA方法的灵敏度和准确性,因而建立一个最佳反应体系是测定的一个重要环节。其中,常用的缓冲液有磷酸盐缓冲液、巴比妥缓冲液、醋酸缓冲液、硼酸缓冲液

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    • 为什么ELISA反应需要一定时间的孵育?

      答:ELISA反应的实质是抗原-抗体特异性结合。抗原抗体完成结合反应的保温过程称为孵育;每次孵育是为了使特异性的抗原抗体彻底结合,以避免在洗脱时把还没来得及与特异性抗原结合

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    • 为什么生物素-链霉亲和素系统能提高ELISA检测的灵敏度?

      答:生物素-链霉亲和素(biotin-streptavidin,BSA)酶免疫测定分析是在常规ELISA原理的基础上,结合生物素与链霉亲和素间的高度放大作用建立的一种检测系统。1分子SA可与4分子B相结

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    • 为什么ELISA技术可延伸和发展为酶联免疫斑点检测?

      答:酶联免疫斑点试验(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT assay)源自ELISA,又突破传统ELISA法,是定量ELISA技术的延伸和新的发展。两者都是检测由细胞产生的细胞因子或其他可

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