答:酶免疫分析技术是经典标记免疫技术之一,20世纪60年代Engvall和Perlmann等在酶免疫组织化学的基础上发展了酶标记固相免疫测定技术,应用于临床各种标记物检测。1972年Rubenst
1答:酶免疫测定技术根据抗原抗体反应后是否需要分离结合与游离的酶标记物分为均相和异相免疫测定两种类型。均相酶免疫测定:在酶标抗原与抗体反应后,标记酶的活性会发生改变,可以
2答:异相酶免疫测定是指在酶标抗体与抗原反应后,先把酶标抗体-抗原复合物与酶标抗体分离,然后测定酶标抗体-抗原复合物或酶标抗体中酶的量,进而推算标本中待测抗原含量;异相法又分
3答:酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)是一种固相的非均相酶免疫测定法,系1971年荷兰学者van Weeman和瑞典学者Engvall最先报道。由于该法具有操作简便,
4答:包被是指将抗原或抗体固定到固相载体表面的过程;该过程可通过被动吸附、间接非共价吸附或共价吸附的方式进行。被动吸附:蛋白通过疏水性相互作用吸附于聚苯乙烯表面,是ELISA
5答:固相载体的选择是酶免疫分析技术中的重要环节。理想的固相载体应具备以下特点: 在检测过程中固相载体作为吸附剂和反应的容器不参与反应; 与抗体(抗原)以非共价或物理吸附方式
6答:酶免疫技术是利用酶催化底物反应的生物放大作用,选择合适的酶对抗体或抗原进行标记,是酶免疫测定中的重要环节。一个酶蛋白分子每分钟可催化103 ~104 个底物分子转变成有色产
7答:辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)来源于植物辣根中,分子质量为40ku,是由无色酶蛋白(主酶)和亚铁血红素(辅基)组成的一种复合物。辅基是酶的活性基团,为深棕色的含铁卟啉
8答:辣根过氧化物酶(HRP)常用的底物有邻苯二胺(o-phenylenediamine,OPD)、四甲基联苯胺(tetramethylbenzidine,TMB)和苯酚偶联底物等。其中,TMB氧化后其产物联苯醌在波长450nm处有最大
9答:抗原一般有三个来源:天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原。天然抗原来自动物组织或体液、微生物培养物等,往往含有多种抗原成分,需经纯化后提取其特定抗原成分方能应用,重组抗原
10答:双抗体夹心法是ELISA检测抗原最常用的方法,但要求检测的抗原分子中至少具有两个抗原决定簇,因此该方法不能用于药物、激素等小分子半抗原的检测。原理是先将特异性抗体包被
11答:类风湿因子(rheumatoid factor,RF)是针对自身变性IgG的抗体,主要是IgM型,能和多种动物变性IgG的Fc段结合。在双抗体夹心法检测抗原时,包被抗体需经洗涤除去未结合的抗体和杂质,然
12答:在双抗体夹心法测定抗原时,常使用一对鼠单克隆抗体与检测抗原反应,如患者因影像学检查和治疗使用过鼠单克隆抗体或与动物有密切接触史,则体内会产生人抗鼠抗体(human anti-mou
13答:间接法常用于血清中抗体的检测。原理是将抗原包被到固相载体上,再与样品中待检抗体结合成包被抗原-待检抗体复合物,再用酶标记的抗抗体(针对待检抗体的二抗,如兔抗人IgG抗体)与
14答:捕获法常用于病原体急性感染中特异性IgM类抗体的检测。受到特异性抗原刺激后一定时间,人体血清内可同时存在针对此抗原的特异性IgM类抗体和特异性IgG类抗体。如用抗原包被
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