双链DNA模板在热作用下(如95℃),氢键断裂,双链解离,形成单链DNA这一过程称为变性。然后系统温度降低,引物退火与互补的DNA模板结合,形成局部的双链,这也是DNA复制的起点。4)、Mg 2 +浓度要合适,它可影响引物的退火、模板和PCR中间产物的链解离、产物的特异性、引物二聚体的形成及酶的活性和错掺率等。标本的纯净度对PCR的扩增效率和特异性有较大的影响,如细菌蛋白和TaqDNA聚合酶抑制因子,可抑制聚合酶的活性,核酸酶可降解DNA模板,而其降解产物可与靶序列竞争,并扩增出大量的非特异性DNA。在循 ......