[辅助检查]第十节　常用原位杂交技术实验步骤

虽然各种原位杂交组织化学技术的基本方法相同，但根据待测靶核酸、探针种类、标记物种类、标本种类及检测方法的不同，每种技术各具特点。本部分主要介绍几种常用的原位杂交组织化学技术实验步骤。下面以碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体为例，介绍地高辛标记的cRNA探针在冷冻切片检测mRNA的间接法原位杂交实验步骤。探针变性:将生物素标记的探针加入杂交缓冲液（ 2 ～ 5 μ g/ml ） ， 75 ℃变性5分钟后立即置4 ℃冰浴中。变性与杂交:洗去预杂交液,滴加地高辛标记的DNA探针或cRNA探针， 95 ℃孵育10分钟后 ......