二、基因工程法

基因工程法构建免疫毒素是通过重组DNA技术将毒素蛋白及抗体的编码基因相互拼接，构成融合基因表达质粒，通过一定的启动子控制在合适宿主中并以融合蛋白形式表达，经分离纯化得到有活性的免疫毒素。需要指出的是，尽管免疫毒素往往可在大肠杆菌胞质内获得高效表达，但蛋白质的体外复性程序烦琐且不同蛋白复性条件差异很大，就某一特定蛋白而言，需要测试不同复性方案，选择最佳复性条件。IraPastan等对PE免疫毒素包涵体复性作了较为系统的研究，其复性方案有一定的普适性，因此被广泛采用，可作为免疫毒素包涵体复性的首选方法［ 12 ......