2)抗原而建立的放射免疫法检测GAD‐Ab或IA‐2A,因可能在标记过程中对抗原部分损伤或掩蔽了部分抗原表位而导致灵敏度下降。我们的研究结果证实,采用125I标记GAD检测GAD‐Ab灵敏度不及采用35S标记GAD(灵敏度仅相当于35S标记GAD的73.9%)。下面介绍35S标记胰岛自身抗原技术[ 8,9 ]。2)cDNA插入到原核表达质粒pcDNA Ⅱ SP6启动子下,构建重组质粒,并转化宿主菌E ﹒ coli ﹒ DH10B,通过原位杂交筛选出含重组质粒的阳性菌落,碱法提取质粒进行酶切和测序鉴定。在体 ......