十三、单一方向cDNA的克隆

以上述方法得到cDNA文库后，可让此基因文库内的重组λ感染大肠杆菌，产生噬菌斑，再利用有标记的DNA或抗体为探针，筛选出含有所需基因的噬菌斑。欲进行此种固定方向的克隆，可在cDNA末端加上转接引物，制造出两端有不同酶切点的cDNA，如在cDNA的5 ’端产生EcoR Ⅰ的切点，而在其3 ’制造出Xho Ⅰ的切点，如图9‐10所示。但基因内可能含有Xho Ⅰ的切点，为了避免cDNA被Xho Ⅰ切断，可在合成第一股cDNA时，以甲基化的dCTP取代普通的dCTP，如此所合成的cDNA其上的C皆被甲基化，不会被 ......