针对这种情况,Varallyay等用锁定核苷酸(locked nucleic acid,L NA)寡核苷酸探针代替传统的DNA寡核苷酸探针进行了改良。据报道改用L NA探针的RNA印迹技术检测成熟miRNA,其效率比传统的使用DNA探针的RNA印迹技术提高了10倍以上。另一种是基于RNA探针的原位杂交技术,这种方法的洗脱条件更为严格,使用氯化四甲铵和RNA酶A的联合洗脱液除去未杂交的探针,为原位杂交提供了更高的序列特异性条件。微球上可连接核苷酸探针或者蛋白质,检测miRNA时连接的是长约10~12nt的m ......