二、哺乳动物细胞表达外源蛋白质的主要方法

根据基因表达的目的与要求，可选择合适的细胞株，构建哺乳动物细胞表达系统。选择合适的商品化哺乳动物细胞表达载体，通过常规遗传操作插入外源DNA序列，验证插入序列的方向和正确性，扩增并纯化质粒。将携带外源基因的质粒载体转染宿主细胞，或以病毒载体感染宿主细胞。6）和脂质体介导的转染技术是目前最常用的哺乳动物细胞基因转染方法。细菌新霉素抗性基因（neor）是哺乳动物细胞表达载体最常用的选择性标记基因，编码氨基糖苷磷酸转移酶（APH），该酶可使氨基糖苷类抗生素G-418（新霉素衍生物）失活。G-418能阻断细胞内的 ......