[辅助检查]第四章 真核基因组RNA研究的基本技术

RNA是基因表达的中间产物，RNA的提取对分子生物学的研究很重要，是研究基因表达在转录水平上的调节必不可少的。细胞RNA都可以拷贝成双链DNA，克隆获得特定细胞来源的cDNA文库。纯净完整的RNA可以用于Northern blot、纯化mRNA、cDNA的合成和体外翻译等。异硫氰酸胍法提取细胞总RNA是目前常用的提取方法之一，其原理是异硫氰酸胍（GIT）是一种强的蛋白质变性剂，不仅能使细胞裂解，还能与β-巯基乙醇共同作用抑制内源性RNA酶的活性。每次使用前应该依次用NaOH、灭菌ddH2O、上样缓冲液洗柱 ......