尽管很早就提出了DNA化学结构的模型,即两条DNA单链,一条以3 ′ → 5 ′,另一条以5 ′ → 3 ′的方向,严格地按A‐T和G‐C相互配对的方式形成DNA双螺旋分子结构。才先后采用“片段重叠法”完成了小分子t RNA和5s r RNA的测序。直到1975年Sanger创造性的提出了DNA序列测定的“加减法”才使基因一级结构的研究开始了飞跃性地发展,不过直至今日几乎所有的DNA测序方法大致上都是基于该法的原理,甚至如今大分子RNA的测序也是先用逆转录酶合成相应的cDAN(complement DNA ......