用超纯水,RNA酶(Promega)- 20℃或- 70℃保存。使用Oligo dT引物要比随机引物和特异性引物的稳定性好(随机引物适合各种RNA的反转录,尤其适合模板丰度很低的情况,比如某个基因表达量很低)。要注意随机引物的量和总RNA量之间的关系,一般建议每5 μ g总RNA的随机引物用量为50ng,如果每5 μ g总RNA的随机引物用量超过250ng,可能会导致小片段产物(< 500bp)的增加和长片段、全长产物的降低。3 .特异性引物特异性引物只能用设计引物时的下游引物做反转录,引物设计质量影响反 ......
——《基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策》
书名:《基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策》
栏目:基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策 > 第一篇 基因组学研究常用实验方法The Experimental Method Commonly Used i Genomic Researc > 第二章 PCR、RT-PCR、PCR-SSCP、实时荧光定量PCR和DDRT-PCR实验技术及常见问题对策(PCR, RT-PCR, PCR-SSCP, Real-time fluorescent quantitation PCR, DDRT-PCR experiments technology and strategies frequently a
作者:郭葆玉
参编:
页码:58-59
版本:1
出版社:人民卫生出版社
出版时间:2010-12-01