样品的来源不同,其裂解物的应用目的不同(如单向SDS-PAGE、双向凝胶电泳、二维连续液相色谱、蛋白质的相互作用等),其裂解缓冲液也各不相同。在此以双向凝胶电泳和免疫共沉淀为例进行简要介绍。无论选取哪种裂解缓冲液,在制备双向凝胶电泳样品时应遵守如下原则:①尽可能的提高样品蛋白质的溶解度,减少不必要的蛋白质损失。在免疫沉淀研究中,裂解条件应该尽可能的温和,尽可能保持目的蛋白的结构完整,并减少无关蛋白的溶解度。如果抗体识别线性抗原表位(如合成肽),那么选择使用强变性裂解缓冲液(如RIPA缓冲液)。用于免疫共沉 ......