[治疗]第三节 caspase-3 siRNA与Nec-1的共同作用对细胞自噬的影响

收集不同组别的SH-SY5Y细胞，用冰裂解液（0.1mol/L NaCl，0.01mol/L Tris HCl，pH 7.6，1mmol/L EDTA，pH 8.0，100 g/ml PMSF，2g/ml Leupeptin），裂解细胞；以Bradford法进行总蛋白定量，调蛋白浓度一致，100℃变性5分钟；每孔加样品10g，于10%SDS-PAGE上电泳分离（60V 30分钟；120V 50分钟）；将凝胶上的蛋白质电转印至NC膜上，丽春红S染色，标记出蛋白质分子量标准；用0.01mol/L PBS洗去丽 ......