[治疗]第三节 caspase-3 siRNA与Nec-1的共同作用对细胞自噬的影响

收集不同组别的SH-SY5Y细胞，用冰裂解液（0.1mol/L NaCl，0.01mol/L Tris HCl，pH 7.6，1mmol/L EDTA，pH 8.0，100 g/ml PMSF，2 g/ml Leupeptin），裂解细胞。将凝胶上的蛋白质电转印至NC膜上，丽春红S染色，标记出蛋白质分子量标准。用0.01mol/L PBS洗去丽春红S，将NC膜置于封闭液（含5%脱脂奶粉的0.01mol/L PBS溶液）中，于37℃饱和封闭1小时，轻轻振摇。二级抗体为辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗兔Ig ......