[辅助检查]四、PCR反应条件

标准PCR反应体系的体积为100 μ l，一般在0.5ml体积的微量反应管中进行。对于一些鉴定实验或临床诊断中只要求快速定性的检测项目，PCR反应体积又常用50 μ l甚至25 μ l即可。反应容器除微量离心管外，也可用毛细玻璃管，更利于反应的升温和降温。对于扩增100～300个碱基的短序列片段，由于Taq DNA聚合酶即使在退火温度下仍保持很强的活性，而延伸过程可在退火温度转变为变性温度的过程中充成，因此可省去延伸反应这一步骤，而采用快速简便的变性、退火双温两步法循环。在设定以上循环参数时，还应考虑到所 ......