层析(chromatography)也称色谱,是利用蛋白质在流动相和固定相中分配不同的原理进行蛋白质分离纯化的方法。由于蛋白质理化特性的不同(分子形状、大小、极性及亲和力等),当蛋白质溶液流经固定相时,不同的蛋白质就会以不同强度的作用力结合在固定相上,实现蛋白质的分离。如果分离一些分子量相近的蛋白质,一般选用排阻限度略大于样品中目的蛋白最高分子量的凝胶,从而大于排阻限度的蛋白质就会径直流出层析柱。如果纯化一个分子量较大的蛋白质,应该先用凝胶过滤层析,使目的蛋白出现在收集液的最前面,以此将目的蛋白与其他蛋白 ......