[文献资料]第四节 原位杂交组织化学基本程序

根据所用探针的种类和靶核酸的不同，原位杂交可分为DNA‐DNA杂交，DNA‐RNA杂交和RNA‐RNA杂交三类。因原位杂交多用于检测组织细胞内的mRNA及其表达，故DNA‐RNA杂交和RNA‐RNA杂交较多见，DNA‐DNA杂交主要用于染色体原位杂交以对染色体中的DNA进行定位。先将生长在培养瓶壁上的细胞用胰蛋白酶处理，制成每毫升含1 × 105细胞浓度的悬液，经离心制成细胞离心标本，使细胞贴附于经处理的载玻片上，经空气干燥1～2分钟后浸渍固定，再经PBS和蒸馏水漂洗后置37℃干燥保存或70%乙醇4℃保存 ......