五、Northern印记杂交

熟悉和掌握Northern blot的原理和方法。Northern印迹杂交是RNA定量测定的一种检测方法，是通过检测RNA的表达水平来检测基因表达的方法。Northern blot首先通过电泳的方法将不同的RNA分子依据其分子量大小加以区分，然后通过与特定基因互补配对的探针杂交来检测目的片段。其基本步骤包括：完整mRNA的分离，琼脂糖凝胶电泳分离RNA ，转移RNA至固相支持物上，在转移的过程中，要保持RNA在凝胶中的相对分布，将RNA固定到支持物上，固相RNA与探针分子杂交，除去非特异结合到固相支持物上 ......