（一）寡核苷酸介导的定点突变

该突变技术利用了M13噬菌体载体的特性，即将待研究的基因插入M13载体，制得单链模板，然后利用含有突变碱基的一段寡核苷酸作为引物，启动单链DNA分子进行复制，合成新的杂合双链DNA，进而用T4 DNA连接酶连接成闭环双链分子。将此杂合双链DNA转染正常大肠杆菌，结果含U的模板链（正链）在尿嘧啶糖苷酶的作用下发生断裂而被破坏，不带U的含有定点突变的负链被保留下来并进行复制，从而使得大部分（可达80%）的子代噬菌体都带有目的突变基因。 ......