第七节 双波长荧光分光光度法宿主细胞重活化实验检测DNA修复

本文建立的测定方法，是宿主细胞重活化实验的改良与发展，与报告基因一起引入参照基因，作为这类基因表达的内对照来校正报告基因的表达。利用两种最近报道的荧光蛋白基因作为报告基因和参照基因，它们的表达可同时用荧光分光光度计来监测。靶细胞用两种含不同荧光蛋白基因的质粒共转染，其中一种质粒在体外损伤，而另一种未损伤的作为对照。转染后不同时间间隔制备澄清的细胞匀浆，两种蛋白的表达通过在两种波长测量其荧光来测定。所得数据用于计算宿主细胞的修复能力。该方法易于实施，可适用于流行病学研究监测个体和研究队列的修复能力。 ......