第三节　质粒构建

质粒构建是本实验室常规操作技术之一，但在构建质粒过程中，若不细心或对实验原理不清，可能也会出现质粒构建失败。本节主要介绍课题组几位同学和本人在质粒构建实验中遇到的难题及其最终攻克方法。针对案例一：我灵机一动，觉得很像筛选抗生素失效，细菌在没有筛选压力的情况下，大量增殖、菌落融合形成片状。我同学使用Xma Ⅰ内切酶后，质粒构建一次成功。针对案例三：通过文献查阅和本人实验结果显示，将这几个片段在一个步骤中连接起来，这看起来很难，但是实际上只要操作得法，很容易做到。可以考虑将连接的产物全部用来转化细菌（当然还要 ......