核酸探针指能与靶核酸序列发生特异性碱基互补杂交,并能通过其标记完成检测的核酸分子。设计高特异性的寡核苷酸探针,需要遵循以下原则: ①如果DNA或RNA样品的核酸序列是已知的,可以从中搜索探针序列,并确定探针序列在靶序列中是唯一的。如果是为了检测基因的表达水平,就要设计长一些的核酸探针,长度可以达到300个碱基。探针标记通常分为标记、清除未标记的核酸探针、检测标记效率三个步骤。有许多方法用于探针标记,如用酶反应或化学反应引入报告基团,对探针进行全程标记。全程标记包括随机引物标记、 DNA缺口平移标记、全程R ......