[文献资料]（二） 基因剔除和基因敲入动物技术

小鼠的基因剔除技术是指利用细胞内染色体DNA可以和导入细胞的外源DNA在相同序列的区域内发生同源重组的现象，在小鼠胚胎干细胞（ embryonic stem cell ， ES cell ）中定点破坏内源基因，然后利用ES细胞发育的全能性，获得从ES细胞发育而来的杂合子小鼠。1988年， Thomas等在ES细胞中利用DNA同源重组的原理实现了对预定基因进行缺失突变（基因打靶） ，基因剔除技术正式建立。通常建立一个基因剔除小鼠的步骤包括基因打靶载体的构建、 ES细胞的DNA转染和基因剔除阳性细胞克隆的筛选 ......