一、PCR‐SSCP的基本原理和应用

将待检测的目的基因片段经扩增后，其扩增产物的DNA双链（ds‐DNA）经化学变性和物理变性为单链DNA（ssDNA），将ssDNA在非变性聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳不仅可根据分子量的大小区分DNA，亦可根据DNA的空间构型分离DNA。因此在SSCP分析中，若ssDNA的碱基序列发生了变化（少至一个碱基的变化），就可导致其构型的改变，其电泳速度也会发生相应的变化，就可在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上区分开来。PCR‐SSCP受测定的影响因素较多，必须对每一种实验方法进行优化及严格掌握实验条 ......