六、BrdU掺入法

细胞将BrdU磷酸化形成BrdUTP，BrdUTP作为前体掺入DNA，代替dTTP。1）培养皿中放一块盖玻片，然后加入细胞悬液，培养24～48小时。2）将1ml 37℃琼脂糖溶液与4ml 37℃的细胞悬液混合。4）在预冷的水中间歇地摇动烧瓶，冷却10分钟，使琼脂糖在石蜡中形成胶状。5）加入35ml预冷的PBS，混合后离心（1000r/min，5分钟）。1）用预冷的抗体稀释液清洗细胞2次。BrdU被掺入到DNA复制位点，这些复制位点可用荧光剂或酶偶联的抗体检测。2 .计数染色细胞，得出有丝分裂指数。有丝分裂 ......