（二）根据序列特异性进行筛选

针对初筛为阳性的克隆，提取其重组DNA，以适宜的限制性内切酶进行消化，经琼脂糖凝胶电泳便可判断有无DNA片段的插入及插入片段的大小。同时，根据酶切位点在插入片段内部的不对称分布，可用该方法鉴定目的基因片段的插入方向。首先将转有外源DNA的菌落或噬斑影印到硝酸纤维膜上，细菌裂解后所释放出的DNA将吸附在膜上，然后将膜与标记的核酸探针杂交，通过检测探针的存在即可鉴定出含有重组DNA的克隆。根据核酸探针标记物的不同，可通过放射自显影、化学发光、酶作用于底物显色等方法来显示探针的所在位置（即阳性克隆的所在位置）。 ......