[速览]三、核酸杂交的实验条件

总的来说，随探针浓度增加，杂交率也增加。依目前的经验，要获得较满意的敏感性，膜杂交中32 P标记探针与非放射性标记探针的用量分别为5～10ng/ml和25～1000ng/ml，而原位杂交中，无论应用何种标记探针，其用量均为0.5～5.0 μ g/ml。探针的任何内在物理特性均不影响其使用浓度，但受不同类型标记物的固相支持物的非特异结合特性的影响。在探针过量的条件下，杂交率主要依赖于探针长度（复杂度）和探针浓度。惰性多聚体可增促250个碱基以上的探针的杂交率。对单链探针可增加3倍，而对双链探针、随机剪切或随 ......