一、Edman降解法测序

蛋白质分子的一级结构测定主要包含多肽链的拆分、水解、肽段分离和氨基酸顺序分析及二硫键定位等步骤。基本思路是：先确定蛋白质分子由几条肽链构成，将肽链拆开分离出单条肽链，然后用化学法或酶法水解成肽段，再对肽段进行氨基酸序列测定。化学法常用的裂解剂是作用于甲硫氨酸肽键的溴化氢，由于蛋白质中甲硫氨酸的含量较低，通过溴化氢裂解后得到的肽段较大，适于自动序列分析仪测定。酶法中常用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶、嗜热菌蛋白酶等。酶法的优点是专一性强，产率高，副反应少，降解后肽段易纯化。裂解:通过无水酸作用将PTC氨基 ......