本结合法的基本原理是先用HRP进行神经元胞体的逆行定位,然后用PAP法通过与HRP不同的呈色反应对神经活性物质进行细胞内定位,即在HRP逆行追踪切片上于呈色反应前先用氯化钴孵育,然后用DAB呈色,使反应产物被加深为黑色沉淀。在免疫反应呈色时则不用氯化钴加深,反应产物呈褐色,借以显示双标细胞而确定投射纤维起源细胞的性质。2 ﹒灌注固定先经心室升主动脉插管灌注生理盐水100ml快冲血管床,继用含4%多聚甲醛的磷酸缓冲液(PB)500ml灌注固定,前半量灌注要快,后半量灌注要慢,时间约1小时。5 ﹒免疫细胞化学 ......