60年代,Howard和Pesch将鼠肝用酶消化,获得了无损伤的肝细胞,用于肝细胞生理学研究。以后Seglen将一步灌注分离肝细胞改为两步灌流法,即通过一个前灌注(pre perfusion)先去除Ca2 +,然后再加胶原酶溶液消化肝组织,这样既有利于肝细胞分离,也使酶充分发挥作用。 ......