三、常规DNA测序的用途

确证性测序是指对已知序列的亚克隆进行证实和鉴定，包括亚克隆DNA的插入方向、定点突变的分析、缺失突变体的鉴定、拟表达基因的阅读框架的调整、基因差异的比较等。用于确证性测序的DNA片段通常较小，故一般只需直接克隆到M13mp或者质粒载体中，进行单链或双链模板测序。对于一个较大的DNA片段的确证性测序，可以利用通用引物分别从两端进行双向测序，再通过中间重叠部分拼出全序列。针对更大的DNA序列，可以在序列的适宜区段增加一个或数个测序引物，分别测序后再拼出全序列。针对不同的测序条件（如手工测序还是自动测序条件、测 ......