[辅助检查]一、用T4噬菌体多核苷酸激酶标记寡核苷酸探针

合成的寡核苷酸在合成时其5 ′端缺少一个磷酸基，因而极易用T4噬菌体多核苷酸化反应，这种探针可达到于γ‐32P从［ γ‐32P ］ ATP本身同样高的放射比活度，使寡核苷酸被放射性标记。以下所述反应是为对10p mol寡核苷酸进行高比活度的标记而设计的。通过扩大或缩小这一反应的规模便可成功地标记不同量的寡核苷酸，而各成分的浓度则可保持不变。4 ﹒如果探针的比活度符合要求，则继续进行放射性标记的合成寡核苷酸的纯化。如果比活度太低，则另补加8单位酶，继续于37℃进一步温育30min（即共90min），并于68 ......