一、双脱氧核苷酸链终止法

DNA的复制有4个基本条件：DNA聚合酶、单链DNA模板、寡核苷酸引物、d NTP（d ATP，d CTP，d GTP，d TTP）。在复制反应体系中，引物与模板退火形成双链区后，DNA聚合酶立刻结合到DNA双链区并启动DNA的合成。在引物的引导下，聚合酶在模板链上沿3 ′ → 5 ′的方向移动，d NTP按照碱基配对原则，逐个连接在引物的3 ′‐OH末端，引物以5 ′ → 3 ′方向延伸并聚合成一条与模板链互补的DNA新生链。常用技术是将靶DNA片段插入噬菌体M13或者质粒载体构建重组DNA，再经过克隆 ......