四、分 型 方 法

Es D同工酶的分型方法有淀粉凝胶电泳法、琼脂糖凝胶电泳法、醋酸纤维素膜电泳法及聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦法等，其中较常采用的方法是分辨率较好，方法简便的琼脂糖凝胶电泳法。非荧光物质，在Es D催化下可分解为4‐甲基伞形酮和羧酸阴离子，4‐甲基伞形酮为荧光物质，在紫外线灯照射下可发出荧光（图11‐。酶谱显现：称取4‐甲基伞形酮醋酸盐5mg，加入少量丙酮（约3滴）助溶后，加5ml底物缓冲液混匀，将一张15cm × 5cm大小的滤纸浸透，铺贴在胶板原点向正极10cm范围内，将胶板置37℃保温5～10min，紫外线 ......