[辅助检查]第二节 常规DNA序列测定的原理

所谓常规DNA测序法，主要是指双脱氧测序法和化学降解法。双脱氧测序法（dideoxy sequencing method）（又称Sanger法）的基本原理如图4-2所示。第二步是经过修饰的碱基从糖环上脱落，进而使无碱基糖环两端的磷酸二酯键断裂，从而产生4套含有长短不一DNA分子的混合物，其长度取决于该组反应所针对的碱基在待测DNA全长片段中的位置。化学降解法的特异性基于第一步反应中肼、硫酸二甲酯，或甲酸仅与DNA链上小部分特定碱基的作用，而第二步的哌啶断裂必须是定量反应。A + G反应：甲酸使嘌呤环上的N ......