二、标签融合蛋白结合实验常见问题的解决与改进

本实验能够进行的前提是获得可溶性的融合蛋白。当融合蛋白的表达水平、可溶性等不理想时，可能难以获得足够的纯化蛋白用于进行结合和沉淀实验。更多的情况是细菌表达的蛋白形成包涵体而影响纯化，此时可以考虑调整培养温度、pH值、IPTG浓度等以改善融合蛋白的溶解度。在无论如何也不能获得足量可溶性蛋白的情况下，也可以考虑用变性复性的方式获得标签蛋白，但是必须充分认识这样获取的相互作用蛋白的假阳性问题，用其他方法进行验证。这样的系统通过几个蛋白标签串联排列，增加了对相互作用蛋白的纯化能力，加上质谱技术的应用，成为在细胞内 ......