另一种确定蛋白质半衰期的方法是放线菌酮阻断法。放线菌酮(cycloheximide)是一种真核生物蛋白质合成抑制剂,它通过抑制蛋白质合成过程的移位步骤阻止翻译的进行。该方法尤为适用于一些难以进行代谢标记的蛋白质半衰期的测定。该方法应用放线菌酮阻断细胞合成新蛋白质,于一定时间后收集细胞裂解液,提取总蛋白质进行SDS-PAGE和免疫印迹,根据免疫印迹结果的灰度扫描密度值计算出待测蛋白质的半衰期。尽管如此,该方法仍是确定蛋白质半衰期的简单有效的替代方法。5 .选择特异性的抗体进行免疫印迹检测,并扫描印迹信号灰度 ......