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二、放线菌酮阻断法

另一种确定蛋白质半衰期的方法是放线菌酮阻断法。放线菌酮(cycloheximide)是一种真核生物蛋白质合成抑制剂,它通过抑制蛋白质合成过程的移位步骤阻止翻译的进行。该方法尤为适用于一些难以进行代谢标记的蛋白质半衰期的测定。该方法应用放线菌酮阻断细胞合成新蛋白质,于一定时间后收集细胞裂解液,提取总蛋白质进行SDS-PAGE和免疫印迹,根据免疫印迹结果的灰度扫描密度值计算出待测蛋白质的半衰期。尽管如此,该方法仍是确定蛋白质半衰期的简单有效的替代方法。5 .选择特异性的抗体进行免疫印迹检测,并扫描印迹信号灰度 ......

——《医学分子生物学实验技术》
书名:《医学分子生物学实验技术》
栏目:医学分子生物学实验技术 > 第十章 蛋白质的定性定量分析 > 第五节 蛋白质半衰期测定
作者:药立波
参编:韩骅,焦炳华,常智杰,马文丽,王丽颖
页码:143-144
版本:3
出版社:人民卫生出版社
出版时间:2014-03-01
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