[概述]六、PCR技术存在的问题

PCR具体操作是一个循环过程，反应在每一因素都可能受其它成分因素的影响，而且每一循环中极微小的变化都将会在PCR扩增过程中被放大，从而引起终产物的很大的差异。因此，讨论PCR技术及其应用中存在的缺点，对于优化PCR操作方案，提高PCR应用价值有非常重要的意义。引起PCR检测假阴性结果出现的原因更为复杂多样，体系中每一材料、每一步骤的不合理因素都可能直接影响靶序列的扩增而致假阴性，在PCR诊断应用中，3 ′末端的错配可能是造成假阴性的主要原因，因为Taq DNA聚合酶缺乏3 ′ → 5 ′核酸外切酶活性，不 ......