[发病机制]三、肝细胞的分离与培养（100）

雄性W istar大鼠，体重200～250g。2 ﹒自门静脉插管，血管夹固定，剪开下腔静脉，同时输入预温37℃的前灌流液，流速12ml／min，冲净肝脏血液，至肝组织显黄色，换酶灌流液（37℃），10ml／min，约10分钟后肝组织软化。3 ﹒取下肝脏置烧杯内（以下操作均在冰浴中进行），加入4℃预冷的D‐Hanks 80ml，撕碎肝脏，剔除结缔组织和肝包膜，将细胞分散。肝细胞在分离中易受损伤，在操作中应注意以下几点以提高细胞得率和存活率：①适度的胶原酶消化，酶消化过度易造成细胞损伤，消化不充分则影响细胞分 ......