三、主要操作步骤

启动子活性报告系统实验本身相对简单（实验流程15-5），但是设计和构建一套带有拟研究的基因启动子及其调控位点的报告基因载体的过程相对复杂，必须予以重视。在设计载体时，特别要注意设立好各种对照，包括不同长短的启动子、转录因子结合位点的缺失或点突变的突变体等，以保证利用这一套载体，可以确切地证实某种特定的转录因子能够结合在启动子上，激活报告基因的表达，而突变的启动子将丧失这种结合能力。近年来，从上述杂交体系中发展出的单一杂交体系技术，也是根据报告基因表达量的检测筛选出与已知顺式作用元件相结合的未知因子的DNA ......