八、单克隆抗体Ig类型的鉴定

鉴定杂交瘤所分泌的特异性抗体属于哪一类型，对于抗体的进一步纯化及今后的实际应用都是必不可少的工作。1 .待查的杂交瘤细胞培养上清液或腹水，硫酸铵。2 .加样：加入5～10 μ l浓缩的杂交瘤细胞培养上清或含单克隆抗体的腹水（用磷酸盐缓冲液稀释30～50倍）至中心孔中，四周孔分别加入抗小鼠IgM、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgA等不同类和亚类的抗血清。4 .若见沉淀线出现，即可依据相对应抗血清的类型确定单克隆抗体的类型。若使用纯化的单克隆抗体作抗原，可将蛋白质浓度调整到0.2～1mg/ml ......