[文献资料]第一节 DNA的分离纯化技术

PCR技术的模板直接来源于相应的核酸，核酸的质和量是决定PCR检测结果成败的关键因素之一，必须把握以下核酸分离和纯化的总原则：保证核酸一级结构的完整性，排除其他分子的污染。核酸模板应至少达到以下要求：不存在对DNA聚合酶有抑制作用的有机溶剂和过多金属离子。不含蛋白质、多糖、脂类等，或将上述分子的浓度降到最低程度。核酸分离纯化主要步骤依次为：①破坏细胞。当大量分离纯化质粒时，通过煮沸法裂解的HB101会释放出相当多的糖类，这给随后用CsCl／溴化乙锭梯度平衡离心纯化质粒DNA带来麻烦。核酸带负电，因此可用离 ......