第二节 高表达细胞株建立

当表达载体构建完成以后，有多种不同方法和系统可以将目的基因导入哺乳动物宿主细胞中。选择瞬时或稳定转染的方法，既取决于实验的要求，同时经济和技术因素也是重要的考虑因素。尽管永久转染和瞬时转染非常类似，二者的区别在于瞬时转染跳过了通过细胞的鉴定与选择来判断质粒整合至细胞基因组这一步。瞬时转染与稳定转染在质粒是否插入基因组方面有着明显得差异，影响转染细胞总体表达水平的因素也有很大的差异。对于瞬时转染系统来说，转染的效率是影响表达最重要的因素，在稳定转染系统中，DNA整合到染色体的频数（拷贝数）以及结合位点变得更 ......