[速览]三、消化 ＋机械刷取法

分离气管、支气管，注入足量的0.05%胰蛋白酶，结扎密闭，37℃消化1h，血清终止消化反应，纵向剪开气管，用细胞刮刀刮刷，收集冲出液与刷洗液，离心、洗涤。该技术的优点在于细胞获取量多、可缩短消化时间，但易增加成纤维细胞的污染和细胞损伤，降低细胞活力与纯度。无菌条件下取出气管，在冰冷的PBS中剔除气管周围的软组织，反复冲洗气管内外，在气管喉段插入套管，于气管近下段结扎，注入足量的0.05%胰蛋白酶，使气管略膨胀，浸入冷DMEM液中，4℃过夜。 ......