一般情况下,ES细胞需要在有滋养层细胞存在的情况下进行培养。但有些实验则不能有滋养层细胞的存在,可以用明胶代替,同时加入1000U/ml的LIF。胚胎干细胞生长迅速,15~18小时就分裂一次,ES细胞系培养时接种的细胞密度相对较高,以保证最大限度地生长,而最低限度地减少ES细胞的分化。轻轻摇动培养板,使细胞脱落,加1ml完全培养基,轻轻吹打细胞为单细胞悬液。1000r/min离心5分钟,将细胞重新悬浮在5ml完全培养基中进行细胞计数,以106 / ml的细胞密度接种到有滋养层的细胞板上。有些实验为减少成纤 ......