[辅助检查]二、自动序列测定

测序DNA模板。Master mix(内含PCR缓冲液、4种荧光底物和Taq DNA聚合酶)8μl。模板的用量视具体情况而定,一般可参照以下标准。但在实际操作中我们发现适当增加模板的用量可以增加信号强度。另外，若双链模板过长，需将模板预变性（沸水浴5min，迅速置冰上）。引物用量视模板用量相应增减。常规NaAC/乙醇法沉淀纯化PCR产物:准备一只0.5ml微量离心管,加入50 μ l无水乙醇和2 μ l NaAc（pH 4 ﹒。8），将反应产物20 μ l（不足时用DDW补足），全部转移到0.5ml微量离 ......