经典的Sanger双脱氧链末端终止法和Maxam-Gilbert化学降解法虽然是目前公认的最通用和有效的测序方法,但都存在一些问题限制了其应用,尤其是在大规模DNA序列测定中的应用。例如存在放射性污染,操作繁琐、效率低下和读片速度慢等问题。据统计,如果按一个熟练的DNA序列分析人员每天测定1kb长度的DNA片段计算,那么进行人类基因组(约3 × 109bp )的全序列分析至少需要100名这样的人员花100年时间才能完成,显然难以适应需要。 ......